CQ1 双转盘共聚焦高内涵分析系统
双转盘共聚焦实现超高分辨率成像
温度/气体控制实现长时间培养及延时成像
自动化高内涵筛选分析
机器自学习/深度学习功能
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1、双转盘共聚焦原理
宽视野的共聚焦微透镜增强Nipkow双转盘
采用横河电机(Yokogawa)专有的多点扫描方法,Nipkow双转盘由一个包含约20000个针孔的Nipkow旋转盘和一个包含相同数量的微透镜的辅助旋转盘(用于将激发激光聚焦到每个相应的针孔中)组成,两个转盘机械固定在电机上,并快速旋转,可以对样本上的激发光进行高速光栅扫描。针孔和微透镜按照我们的专有设计布置在每个磁盘上,以优化光栅扫描。多光束扫描不仅提高了扫描速度,而且还显著降低了光漂白和光毒性,因为多光束激发只需要样品上的低水平激光功率即可完全激发荧光。
2、产品概况
CQ1 双转盘共聚焦高内涵分析系统是Yokogawa公司2014年研发的一款超快速、稳定、灵活、模块化的共聚焦成像系统,采用其最新一代微透镜双转盘共聚焦模块,由20000个微透镜组成的增强型微透镜双转盘技术,提供高分辨率图像,同时整合强大的分析功能软件,是一款成像灵敏、分析强大、价格适中的高内涵成像分析仪。
CQ1可以实现活细胞和细胞群体的高清3D成像、目标识别及快速定量分析。图像与数据相关联,可以深化实验结果解读,提升数据的可靠性。其独特的成像技术减少了对细胞的光毒性,温控成像舱室如同细胞培养箱,因此可支持活细胞的延时成像。CQ1有多种配置供选择,并支持智能整合从而实现全自动成像分析,是药物筛选、细胞分析及类器官研究的理想选择!
3、产品特点
1、可测量细胞球、克隆和组织切片
与流式细胞仪不同,无需细胞剥离等预处理即可检测培养皿中的细胞
得益于转盘共聚焦技术,可快速、温和地获取3D图像
支持4色激发光和10色发射光;支持明场/相差成像
带有丰富的特征提取功能,便于进行复杂的细胞分析
宽视野和拼图功能可轻松对大样本进行成像
2、支持延时和活细胞分析
高精度的培养箱和共聚焦的低光毒性使延时和活细胞分析成为可能。
最大20fps选项,可实现快速延时摄影。
3、强大的高内涵分析系统 CellPathfinder
具有适用于各种应用的预设分析菜单
具有显示分析结果的灵活图形功能
图表和对象图像机器学习之间有直接联系
4、提供类似流式细胞术的分析功能
图像采集同时进行分析(实时分析)
模块化应用分析
分析数据可追溯至原始图像,数据图像互相印证
多合一系统,操作简便
5、开放式平台
可作为图像采集或分析设备扩展为整合检测系统
可输出第三方数据分析软件可读的FCS/CSV/ICE数据格式
可连接机械臂实现全自动成像分析
适用多种细胞培养和样本容器
6、小巧轻便的台式设备,无需暗房
4、广泛的应用领域
典型的应用领域包括:
细胞生物学研究
类器官研究
神经生物学研究
干细胞研究
药物筛选
应用展示
1、细胞球的3D成像和分析
CQ1是简单易用的3D检测系统,提供简单的细胞识别、克隆计数和复杂的克隆特性分析,包括全孔成像和定量分析。
应用1:质量分析:诱导分化。聚合细胞图像以切片形式拍摄并以3D呈现。
软件模板:使用“细胞球结构”,对细胞球等聚合细胞进行逐个细胞检测,通过图像分析量化标记物表达水平及单个细胞的空间信息。
应用包括:细胞球、分化等。
应用2:质量控制:人iPSC细胞球成像和检测。细胞球形状和多潜能标记物表达水平是评价人iPSC细胞球多潜能状态质量的合适指标。
软件模板:使用“克隆检测”,对细胞球等聚合细胞进行逐个细胞检测,可进行克隆生长的评估和分化状态。
应用包括:克隆生长评估、分化等。
2、支持各种高内涵分析
CQ1的高质量共聚焦图像支持多种类型的图像分析。形态学、颗粒分析和其他需要高分辨率图像的高内涵分析。
应用1:高内涵分析:γ-H2AX焦点形成
组蛋白H2AX Ser139(γ-H2AX)的磷酸化是双链DNA断裂的重要事项之一。通过结合使用高速共聚焦图像采集和颗粒分析模板,可以轻松地对γ-H2AX焦点形成进行定量检测。
软件模板:使用“细胞核中的点”,可以对细胞质和细胞核中的点进行检测,通过共聚焦成像精确分离单个点。
应用包括:FISH、GPCR等。
应用2:核转移
NFκB是著名的DNA转录因子之一。NFκB在调节免疫反应和炎症中起关键作用,作为肿瘤治疗和抗炎药物靶点备受关注。NFκB与IκB均位于细胞质中,IκB是抑制蛋白。一旦信号通路通过细胞膜受体被细胞因子刺激激活,会将IκB从NFκB中分离并激活NFκB。然后NFκB易位到细胞核中以结合特定的DNA序列,从而诱发炎症。细胞核和细胞内的NFκB水平表明细胞质和细胞核之间的蛋白质水平。
软件模板:使用“细胞核和细胞质”,可通过共聚焦成像精确分离定位。
应用包括:核转移、细胞膜易位等。
3、支持延时成像和分析
CQ1使细胞在培养箱中更舒适,可实时观察细胞的反应。通过低光毒性和光漂白实现活细胞的延时成像,从而了解活细胞。
应用1:延时分析细胞凋亡
按10,000个细胞/孔将HeLa细胞铺板到96孔微孔板中。使用Hoechst33342(1?g/ml,30 min,37℃)染色并通过十字孢碱(星形孢菌素)(0-10 ?M)处理,每15分钟拍摄一次图像。 在十字孢碱10?M处理下识别细胞核的DNA片段化区域。
软件模板:使用“细胞核”,可对细胞核的体积、强度和形态进行检测。
应用包括:细胞周期、细胞凋亡等。
应用2:延时分析ESC克隆
CQ1可以进行低光毒性的图像采集,通过对克隆大小和单个细胞的延时分析,可以监测克隆的形成状态。
软件模板:使用“克隆检测”,通过时间进程检测可以监测细胞克隆的生长。
应用包括:细胞克隆生长、分化等。
4、循环肿瘤细胞检测
肿瘤细胞通常通过血液和淋巴液转移,运用CTC检测方法,可以更早的发现癌症的复发和转移。在10毫升癌症患者血液中有超过1*10^6 个血细胞,其中仅含有不到100个CTC。流式细胞仪会将CTC检测为干扰,因而难以将其用于CTC检测,而通过CQ1却可以轻松检测稀有的CTC。如下图CTC定量示例,仅CD45为阴性时可判断为CTC。
软件模板:使用“CTC”,可以检测细胞的多个标记物,不仅可以检测CTC,还可以检测其他特异性标记物。
5、细胞周期分析
利用CQ1的多色通道功能进行与H3Ser10P免疫荧光相关的细胞周期分析。组蛋白分子在细胞周期进程中被磷酸化, 组蛋白H3的第10个丝氨酸的磷酸化是G2晚期到M进程的特征之一。
软件模板:使用“细胞周期”,可以通过检测细胞周期来验证药物治疗的效率。虽然通过流式细胞仪可以实现,但CQ1可以分析更多高内涵分析的典型参数。